24小时热门版块排行榜    

查看: 9589  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

不负青春7

新虫 (小有名气)

[交流] 关于溶解曲线-RT-qPCR熔解曲线标准质粒和样品的峰值Tm值不同已有4人参与

如图,前面的峰是标准质粒的,后边的峰是我的土壤样品的,两个峰相距太远了。标准质粒的峰应该是没什么问题的,和别人的横坐标值差不多,就是不知道样品为什么会是这样。另外,标准质粒是我自己PCR后,胶回收,连接转化等步骤后做的。请问前辈们大神们,这是为什么啊?这样做出来的数据能用吗?

关于溶解曲线-RT-qPCR熔解曲线标准质粒和样品的峰值Tm值不同
溶解曲线.gif
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不负青春7: 金币+3 2016-02-18 13:07:08
样品是土壤中提得metagenome?若是,这个reasonable。你的standard可以用土壤做的。
向钱看,向厚赚
3楼2016-02-02 05:08:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

lifechuteng

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不负青春7: 金币+2 2016-02-18 12:53:50
跑个电泳,看看样品的条带跟质粒的条带是否一样大小~
2楼2016-02-01 12:11:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不负青春7

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-02-01 12:11:40
跑个电泳,看看样品的条带跟质粒的条带是否一样大小~

放假回家了,没有及时看帖,很抱歉。谢谢您的回复。我跑了电泳的,见下图,条带不是很清晰,前几条带是质粒的,后几条是样品的。大体上看起来是差不多大小。
4楼2016-02-18 13:06:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不负青春7

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 懒蛋 at 2016-02-02 05:08:20
样品是土壤中提得metagenome?若是,这个reasonable。你的standard可以用土壤做的。

宏基因组我不太懂是什么,因为我主要学化学。我的质粒是在土壤样品中提的。但是standard和样品的Temperature相差很大,我看别人说Tm相差要在1以下,但是我的远超过1了,这个数据可以用吗?会不会不是同一种东西啊?
5楼2016-02-18 13:11:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见