24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2986  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lixuxiao12

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助啊!cDNA扩增不出特异性条带! 已有1人参与

脾脏中提RNA,后用两步法进行特异性扩增。图最左是DL2000,之后从左往右依次的扩增条带本来应该是600多,1000多,500多。但是PCR(预变性94℃ 5min 30个循环94℃1min 55℃1min 72℃70s 之后72摄氏度7min)后电泳(2%的胶)出现很多非特异性扩增(只有600多那个出现了很浅很浅的特异性条带)。。。

1.没有出现目的条带,出现很多非特异性扩增,请问是引物的特异性问题吗?还是PCR温度的问题??
2.那个在点样孔边缘很细很亮的条带是什么啊??是不是RNA没提好导致cDNA出现了问题啊??

求助啊!cDNA扩增不出特异性条带!
2016_1_30 2016-01-30 13 时 36 分_副本.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dragonhmw

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by lixuxiao12 at 2016-01-31 13:34:39
我是用的10微升体系跑的,上游下游各0.4微升,cDNA0.4微升,这样的话引物还是多吗??
...

引物的浓度是10mM, 0.2微升引物就可以了
8楼2016-01-31 17:47:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

新欣小生

银虫 (小有名气)

时间会证明一切
2楼2016-01-31 00:19:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixuxiao12

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 新欣小生 at 2016-01-31 00:19:39
跑的总RNA?

用cDNA跑的哈!
3楼2016-01-31 01:11:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Xie_Zijing

新虫 (初入文坛)

应该是引物的问题,建议重设引物

发自小木虫Android客户端
4楼2016-01-31 08:35:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂求院校招收 +5 鹤鲸鸽 2026-03-28 5/250 2026-03-29 01:10 by 我是小康
[考研] 0703 化学 求调剂,一志愿山东大学 342 分 +4 Shern—- 2026-03-28 4/200 2026-03-29 00:47 by 544594351
[考研] 321求调剂 +6 璞玉~~ 2026-03-25 7/350 2026-03-28 17:48 by 璞玉~~
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 9/450 2026-03-28 09:58 by zhshch
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分,前三科223分 +5 dongfang59 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:53 by wxiongid
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 机械学硕310分,数一英一,一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
信息提示
请填处理意见