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一个不小心就

金虫 (正式写手)

[求助] 蛋白质电泳,SDS-PAGE求指教 已有5人参与

头疼!!求大家指教。
我跑SDS-PAGE的时候胶总是变形,如图所示,蓝色的那条线是溴酚蓝。注意:上样孔有点扭曲,两层胶的分界线不直,这都是跑胶以后造成的。
跑胶条件:60V,跑10h,室温不高于6℃。灌胶的时候充分摇均匀了。

蛋白质电泳,SDS-PAGE求指教
变形凝胶.jpg
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pandezhuo

银虫 (著名写手)

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一个不小心就: 金币+3 2016-01-23 13:45:22
如果你只是跑小胶,这么长的时间肯定是有问题。第一,检查下分离胶和浓缩胶的浓度。第二,配胶的问题,分离胶的凝固时间在十五分钟到三十分钟,分离胶灌好后要用70%乙醇封胶,这样才能保证分离胶面成直线。配浓缩胶前,要降乙醇倒掉,用缓冲液洗两遍后再灌浓缩胶。配好胶后最好过夜再用。第三,电泳时可以用恒压也可以用恒流,我们是使用恒流,浓缩胶10mA,分离胶20mA,总共3个半小时。

发自小木虫Android客户端
16楼2016-01-23 12:50:24
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-23 22:43:17
出现过这种情况,但是实在电压太高的情况下出现的。你这个是不是跑太长时间了
2楼2016-01-22 10:47:20
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反应链

新虫 (正式写手)

If electrophorsis is carried out at low temperatures, use lithium dodecyle sulfate (LiDS) instead of SDS. LiDS does not precipitate at low temperatures.
3楼2016-01-22 11:18:26
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swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫

跑胶时间太久导致的,一般跑胶两个小时左右就可以了
生命在于运动
4楼2016-01-22 12:18:05
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