| 查看: 2699 | 回复: 13 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
染色体步移 已有1人参与
|
||
| 目前在利用takara的genome walking试剂盒克隆玉米中一段启动子序列，第一次利用AP1-4的时候均得到了1.3kb的产物，设计特异引物克隆这一段，已经测序得到这一段序列。在此基础上进行第二次walking，第三轮的GSP设计在距离第一次1.3kb 5‘端140bp的位置，这次AP1,3，4得到的产物相似，AP2得到产物略小约900bp，然后设计一对引物可以检测出上面提到的140bp进行初筛，结果只有AP2中所有克隆都含有这一段，克隆、测序、BLAST比对，900bp可以比对到染色体上相应位置，并且与第一次的1.3kb可以重合。拼接后得到约2.0kb的区段，只需要对1.7kb的区段进行研究，设计引物扩增，在玉米B73中克隆到目的条带，但是未知材料里没有任何产物。请教一下各位，这是什么情况？明明两轮WALKING得到的产物可以拼接上而且在未知材料中得到的1.7kb也可以比对到染色体上相应位置，但是扩增不出来，其中的1.3kb已经得到证实，PCR体系及条件没有问题，求解。 |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有56人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
6楼2016-04-14 01:56:40
3楼2016-01-22 12:34:44
dushangyun
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1151.5
- 散金: 105
- 红花: 4
- 帖子: 96
- 在线: 44.1小时
- 虫号: 3707373
- 注册: 2015-03-03
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2016-03-14 18:40:55
5楼2016-04-12 17:41:21
