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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助，PCR跑不出条带了，为什么呢？
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loveming313

新虫 (小有名气)

[求助] 求助，PCR跑不出条带了，为什么呢？

4.扩增条件：
Step#        Temp ℃        Time        Note
1        94        3min        -
2        94        30sec        -
3        65        30sec        -1C per cycle
4        72        1min        -repeat steps 2-4 for 10 cycles
5        94        30sec        -
6        55        30sec        -
7        72        1min        - repeat steps 5-7 for 28 cycles
8        72        10min        -
9        10        -        hold

PCR产物电泳结果图

求助，PCR跑不出条带了，为什么呢？
PCR结果.png
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Find the sunshine in your heart,let it go,you can get past the rainyday
1楼 2016-01-21 16:47:54
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loveming313

新虫 (小有名气)
这是之前做的，现在出现情况：666bp可以P出来，850bp就是死活出不来，实在是要求助各位大侠呀
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Find the sunshine in your heart,let it go,you can get past the rainyday
2楼2016-01-21 16:51:34
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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by loveming313 at 2016-01-21 16:51:34
这是之前做的，现在出现情况：666bp可以P出来，850bp就是死活出不来，实在是要求助各位大侠呀

建议通过设置退火温度梯度，确定最佳退火温度（应该在55-65℃之间）
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3楼2016-02-02 11:49:31
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