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loveming313

新虫 (小有名气)

[求助] 求助,PCR跑不出条带了,为什么呢?

4.扩增条件:
Step#        Temp ℃        Time        Note
1        94        3min        -
2        94        30sec        -
3        65        30sec        -1C per cycle
4        72        1min        -repeat steps 2-4 for 10 cycles
5        94        30sec        -
6        55        30sec        -
7        72        1min        - repeat steps 5-7 for 28 cycles
8        72        10min        -
9        10        -        hold

PCR产物电泳结果图

求助,PCR跑不出条带了,为什么呢?
PCR结果.png
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Find the sunshine in your heart,let it go,you can get past the rainyday
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loveming313

新虫 (小有名气)

这是之前做的,现在出现情况:666bp可以P出来,850bp就是死活出不来,实在是要求助各位大侠呀
Find the sunshine in your heart,let it go,you can get past the rainyday
2楼2016-01-21 16:51:34
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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by loveming313 at 2016-01-21 16:51:34
这是之前做的,现在出现情况:666bp可以P出来,850bp就是死活出不来,实在是要求助各位大侠呀

建议通过设置退火温度梯度,确定最佳退火温度(应该在55-65℃之间)
3楼2016-02-02 11:49:31
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