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a-淀粉酶抑制活性的研究 已有1人参与
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本人之前做植化，先为补充文章数据，补做活性部分实验，经验不足，想请做过 样品对a-淀粉酶抑制活性研究 的童鞋们给个意见或提个建议！本人现在先做阿卡波糖对a-淀粉酶的抑制，但算抑制率时出来的结果有负值，重复好几次，负值一次比一次多，实在想不出是哪步操作除了问题，具体操作如下，若有问题请各位指出： 1、空白管：100uL酶液+100uL50%DMSO，空白对照管：100uL缓冲液+100uL50%DMSO，抑制管：100uL酶液+100uL不同浓度阿卡波糖溶液，背景对照管：100uL缓冲液+100uL不同浓度阿卡波糖溶液，放在37C下反应20min； 2、配制底物：取0.05mol/LpH 6.9的Tris-HCl缓冲液10mL加在盛有11mgCaCl2+100mg淀粉天青的烧杯中，在电炉上煮沸5min，37min下放置5min，即成底物； 3、分别取200uL的底物加入到1中的各管中，37C下反应10min； 4、取出来各加0.5mL的50%冰醋酸停止反应，离心，595nm测吸光度。 以上就是我的实验步骤，若有不足请指出，急！谢谢！ |
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