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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 如何用酶标仪测试反应动力学？
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youyi

铜虫 (小有名气)

[求助] 如何用酶标仪测试反应动力学？已有3人参与

现在想用酶标仪测乙酰胆碱酯酶的活性，并加入不同浓度的抑制剂来看不同浓度抑制剂的抑制效果。但是不知道该如何检测？
酶标仪有两种检测方法：一种是直接测吸收波长的OD值，96孔板直接扫描出对应孔的OD值；还有一种测酶反应动力学的选项，假设1min间隔，测10min，出现11组数据，该如何做动力学?怎样比较抑制剂的抑制作用？体现动力学？
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1楼2016-01-18 10:39:18
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wxy_0808

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

在酶标仪动力学测定模式下，获取个反应时间点下OD值，用Linewaver-Burk双倒数作图求得乙酰胆碱酯酶反应动力学米氏常数Km及Vmax，绘制曲线即可。依据Km及Vmax反应抑制剂的抑制作用。
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3楼2016-03-23 17:20:11
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cccontainer

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我用的选项是测动力学的曲线，softmax软件。处理数据时，先根据一个浓度，做出时间和吸光值的散点图，添加趋势线，几种浓度抑制剂的趋势线都做好后，根据他们相应的趋势线斜率计算抑制率，从而绘制抑制率曲线图。
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2楼2016-03-23 10:38:12
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海之蓝的美

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wxy_0808 at 2016-03-23 17:20:11
在酶标仪动力学测定模式下，获取个反应时间点下OD值，用Linewaver-Burk双倒数作图求得乙酰胆碱酯酶反应动力学米氏常数Km及Vmax，绘制曲线即可。依据Km及Vmax反应抑制剂的抑制作用。

你好，我准备做酶动力学，不太明白那个反应初速率要怎么测，以及反应速率的就算，麻烦你看见后，能指导一下，急求
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4楼2016-05-16 20:17:14
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tulipsy

铜虫 (正式写手)
楼主你好，请问用酶标仪测试反应初速率以及反应速率的求算问题解决了么？我也遇到了相同的困扰，一直卡在这个地方，急需···谢谢···
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5楼2017-05-10 10:39:43
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