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豆哥

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[交流] 【求助】肿瘤实验的一些问题

我的抗肿瘤实验已经开始做预实验了,因为是从隔壁实验室拿来的瘤株,直接接种就好了。这段时间遇到了很多问题,请较各位战友。
1. 我做的是H22肿瘤,现在是给药第七天,肿瘤基本上都长出来了,但是从形状看,都是扁扁的,不知道是不是这样。
2. 以前灌胃的时候都是正常的小鼠,现在这些小鼠肿瘤长起来后,不知道为什么特别难灌了,有好几只明明是感觉到位了,灌的时候阻力很大,不知道为什么;更可恶的是,有几只就直接给灌死了。给肿瘤小鼠灌胃的时候要注意那些呢?
3. 今天拿灌死的那几只解剖的时候,瘤块感觉好像长到骨头里边了,我没见过真正的瘤块是什么样的,看论坛上有人说S180的瘤块是脆的比较好剥,我也有这个感觉,但是怎么剥不完整呢?好像还有黄色的组织液之类的东西。
4. 这个实验我是在老板的指示下自己摸索做的,前段时间也问了,关于机制指标的选择,免疫机制除了几个免疫器官的系数以外,还有TNF-α和 IL-2,此外,以前我选的还有体液免疫和细胞免疫的一些指标,比如半数溶血值、T 淋巴细胞的转化功能和NK细胞活性。有人对我说,我做的都是免疫机制,论文的话(这是我毕业课题的一部分),多做几个机制(她建议我做凋亡)比较好。可是我想实验室的条件有限,如果做凋亡的话要到外面,可能老板就不太乐意了。所以我想问下,T 淋巴细胞的转化功能和NK细胞活性,都用MTT法,因为牵扯到细胞培养我没做过,这两个好不好做?对我这种菜鸟来说。
这个实验关系到我的毕业,这几天灌胃死了好几只,郁闷死了。幸好是预实验。先问到这里吧,以后还会有问题请教大家的!!
希望得到大家的帮助。
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边学边问,才有学问。
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matureboy

铁杆木虫 (正式写手)

请教一下,你说的做凋亡,能说说思路么?
2楼2008-11-16 11:32:32
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judy19851023

铁虫 (小有名气)


xy4585618(金币+1,VIP+0):3Q
MTT法,我本科毕业论文就做的这个,做了33个药的筛选,我觉得不是很难,只要铺板的时候铺均匀一点就行。
3楼2008-11-16 18:27:56
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Sophia0304

金虫 (初入文坛)


xy4585618(金币+1,VIP+0):3Q
MTT法我现在正在做,只要细心一点,按部就班的进行就可以了,希望你实验顺利啊
4楼2008-11-17 11:06:05
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daijianfeng

银虫 (小有名气)

有同感  郁闷……
我走在这彷徨的迷途 脚下的坎坷 让我感到世界的无知
5楼2008-11-18 20:50:46
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ragnarok

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教!
第一个问题,不知道lz是用什么小鼠做的。如果是普通小鼠,做实体瘤可以在腋下注射,效果比背部皮下注射好。

第二个问题,不好灌很可能是因为灌胃手法引起的,导致小鼠食管等器官肿胀而不好灌。
6楼2008-11-21 12:02:42
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lqqm

银虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
灌胃的问题:不知道你的进针手法是什么样子的,如果在灌胃的时候小鼠挣扎的话,很可能刺破食管进入靠近腋下的位置,这样会感觉阻力较大,而且小鼠会挣扎的更厉害,灌完之后很快就会死掉

细胞培养不是很难,首先要确定绝对的无菌条件,细心一些按照标准操作规程操作就可以了
7楼2008-12-02 17:04:05
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xiaozhao511

铁虫 (初入文坛)

我的一些心得


lwf991229(金币+1,VIP+0):3Q~
你是腋下接种吧,瘤子长得较扁可能是你接种时瘤液注射的太分散,长到骨子里是因为你进针时进的太深,并不是进到皮下。瘤子长出来后并不影响灌胃给药,你灌时有阻力,且灌死老鼠了可能是由于你灌胃操作不熟练再加上有瘤子在,心情比较紧张h吧,慢慢来,多练练就会好的。H22瘤子如果接种在腋下皮下也是挺好剥离的,贴着皮用镊子刮后即可托起。加油,一定行的
8楼2008-12-08 22:52:43
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tearain

银虫 (小有名气)

我是猪头!


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
H22成瘤性还是不错的,如果和楼上的说得接在腋下的话确实很会有因为接种手法不对,接种后最好接种进去的细胞悬液可以形成以个小隆起,如果太散,铺在皮下,肿瘤就可能长得过于散。我们这又个哥们是将H22接在小鼠腿部的,还不错。
细胞实验的MTT是最简单的细胞增殖实验,只要能养细胞就没有问题。相信你,肯定没有问题。
人类之所以造就了现在这个繁华肮脏的世界,不是因为人学会使用工具,而是学会了使用”人“。
9楼2008-12-17 16:44:47
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marmot120

木虫 (正式写手)


clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢指导~! 3-8 20:15
H22瘤我们经常做,主要是接在腋下,比较好剥离,灌胃是手法问题,你应该多练习一下,应该不是问题
平常心心常平
10楼2009-03-06 21:53:16
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