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新手 关于引物设计的疑惑 已有3人参与
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| 我做的工作跟动物免疫有一点联系 最近老师让我设计引物扩增表达一个病毒的结构蛋白 模板的来源是动物病料。我现在疑惑的是扩增的话是扩增整个CDS还是可以选取其中一部分序列？ 如果要扩增整个CDS的话 引物的设计可以在这个CDS的外面吗？ 我看到有的人说直接选取开头和结尾，这样做会不会有问题？ |
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7楼2016-01-17 16:39:17
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-14 23:02:52
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-14 23:02:52
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直接选开头结尾，加上酶切位点保护序列，注意上下游引物的退火温度，不要相差太大，3端最好是gc结尾 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-01-14 16:35:50
3楼2016-01-14 17:06:36
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
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- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-14 23:03:16
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-14 23:03:16
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要是做蛋白表达的话，如果没有其他辅助domain的话，应该保证CDS序列的完整，只能从开头和结尾设计，如果往外多扩增则无法保证目的蛋白的正确性 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-01-14 20:37:29
