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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切产物转化，长满了菌
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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)

[交流] 酶切产物转化，长满了菌

本人用平末端酶酶切完以后，直接用1/10NaAC,2倍体积的乙醇，70%的乙醇处理，最后用洗脱液溶解。我将获得产物取2.5uL转入DH5α中，结果在相应抗性的LB板上长满了菌，我觉得很费解。还请知道的虫友不吝赐教，谢谢啦！
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1楼 2016-01-10 23:07:40
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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by evil丶zero at 2016-01-11 11:55:25
胶回收后浓度应该是有变化的。长出菌落的原因可能有：E.coli细胞通过某种DNA修复机制将线性化质粒环化，毕竟细胞经过了生理期；还有，可能是你没有完全切开，但是你说你用胶回收结果还是有菌落，这个实验应该是排除 ...

谢谢你的回答

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11楼2016-01-11 18:34:17
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evil丶zero

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
个人觉得是因为你转入了E.coli后，细胞内部的修复机制引起的。

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2楼2016-01-11 00:42:49
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xiangshengyan

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
not completely digested
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ANNA&KEVIN
3楼2016-01-11 01:50:15
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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by evil丶zero at 2016-01-11 00:42:49
个人觉得是因为你转入了E.coli后，细胞内部的修复机制引起的。

我用胶回收，再转化，板子上只长了几个菌

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4楼2016-01-11 08:28:37
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