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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 用大肠杆菌表达重组蛋白，总在摇瓶扩大时出现先浑后澄清和诱导后变澄清的现象，为什么
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zlee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可能是噬菌体污染，可以购买抗噬菌体的感受态试试， 把已有的全部灭菌处理掉。
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11楼2016-01-13 11:10:44
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ranly1020

新虫 (初入文坛)
也有可能是表达的蛋白毒性导致的。
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12楼2016-01-15 09:23:25
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企鹅知道了

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-01-12 20:50:38
我倒觉得噬菌体污染的可能性很大的，我们也常出现这样状况，通常是那一批感受态扔掉，重新做一批，另外出现变澄清的菌液不要随手倒掉，连瓶子一起灭菌处理。

我也觉得，噬菌体污染这种情况，很很符合。你们的灭菌锅？你们的超净台？
就算是感受态或者转导的质粒。有问题的话，混匀就能避免上述情况。但是这种事情又不能说太死

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13楼2016-01-15 09:49:15
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syhzlsd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们实验室也遇到过，很头疼，因为这种情况出现都是在一段时间内，过了一段时间就全好了，所以我觉得是染菌了，极有可能是抗生素或诱导剂污染了，或者你的操作环境超净台污染，所用器具污染都有可能。。。
建议你检查一下你的试剂，有问题就重新换掉，有关操作的环境要彻底灭菌，祝顺利！！
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14楼2016-01-15 15:15:25
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雁过留名

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by xingwancai at 2016-01-12 21:09:33
噬菌体侵染！

你们怎么消灭噬菌体的？我的就是摇起来然后半个小时变清 死了几十升了

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15楼2017-03-14 22:30:38
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shanda700950

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

大多数是噬菌体引起的，噬菌体灭活比较麻烦，需要熏蒸，如果处理的不彻底噬菌体经常存在，导致培养失败。
平时环境保护很重要，接触过菌体的设备必须灭活处理。
也有可能试剂有问题，换一批次的试剂试试。
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16楼2017-03-15 13:35:02
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歪果仁shu

新虫 (小有名气)
我也这样，博后师姐发酵也是加完诱导剂后就变清，我也是，有时候甚至都挺不到诱导，不过500毫升的瓶子摇菌效果更佳

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17楼2017-03-15 22:52:23
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吹着风吃西瓜

新虫 (初入文坛)
我遇到了好几次，真是郁闷！

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18楼2017-05-18 00:39:50
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科研狗的春天

新虫 (初入文坛)
正在遇到这个问题，头都大了！

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19楼2018-03-30 10:11:13
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