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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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leland2

新虫 (正式写手)

[求助] 转化涂菌 一般几个小时之后开始长菌 已有2人参与

本人最近一直在做转化涂菌。昨天晚上100ul 转化体系 +400ul2Y-T  200转 50min  之后4000转 8 min 。再用200ul 重悬菌。图板。   十小时之后观察未长菌
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donggang1018

新虫 (初入文坛)

大多数情况下,如果感受态状态好的话,不复苏,依然可以长菌,转化实验我都是从来不用复苏的,做出的效果也很好,如果十小时都没有长菌,那就不会再长了,如果超过十六小时,长出来的可能是杂菌。

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-31 14:14:05
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肖大爷1314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
转化结束后不能立刻铺板,因为虽然质粒已经转进去了,但是抗生素的蛋白还没有表达出来,所以直接铺板会被抗生素杀死。建议做完转化后,先在不含抗生素的LB液体培养基里摇半小时再铺板。而且刚经历过感受态的细胞比较脆弱,活性很差,不经过复苏的话直接涂在带有抗生素的平板上会被杀死。当然,也可能是连接效率低,感受态质量不好,转化效率低,复苏时间太少,涂板时涂布棒温度过高等等原因,做好做个对照实验,不然错在哪里都不知道。祝顺利!
追求真理的道路上永远不会孤独
2楼2015-12-31 10:23:16
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siriusxuan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
12小时左右,10小时长得太小,你可能没看到。
此座可言轻社稷,江山万里起风尘。
4楼2016-01-01 09:52:09
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leland2

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by siriusxuan at 2016-01-01 09:52:09
12小时左右,10小时长得太小,你可能没看到。

谢谢
5楼2016-01-03 13:01:45
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