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江峡丹香

[交流] 急!急!急!

我 现在做一个品种,用液相测样品的含量,流动相是磷酸二氢钾(0.001mol/l,PH6.9):甲醇(100:0.2)标准上是用C18柱,可是这个 品种对柱子伤害太大了,刚开始以为是缓冲盐的 破坏,但一是缓冲盐浓度很低,二是我们确实按要求冲洗了,结果还是不起作用,每一根新柱子用不过两次都不行了。 这里面含有多肽,我考虑是不是蛋白的 影响,样品里面含有多肽(所谓多肽,它是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物。它由氨基酸构成,但与蛋白质又有所不同,属于它们之间的中间物质。氨基酸能够彼此以肽键相互连接的化合物称作肽。一种肽含有的氨基酸少于10个就被称为寡肽,超过的就称为多肽,氨基酸为50多个以上的多肽称为蛋白质)。已经试了两根柱子了,很急。希望各位给出高见!!!
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雨后

铜虫 (小有名气)

我觉得对于C18柱你的流动相用得有点极端,它一般要求有机相不低于5%;蛋白影响的话一般柱压升高很快;
6楼2008-10-14 21:37:58
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kkbyb

木虫 (著名写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢应助!
几乎相当于纯水做流动相了,用AQ的耐水柱。还有我不明白你说的柱子破坏是指什么,是压力高堵柱子?还是峰形变差?
2楼2008-09-27 14:24:13
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哈利


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢!
峰形变差,系统评价(理论塔板数降低,峰变宽等),大多数情况下柱压没有变化。听有些老师说C4柱可以测蛋白,C18不可以。里面含有多肽,我考虑是不是蛋白的 影响。但按这个条件测的不是多肽。
3楼2008-09-27 15:57:39
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polycao

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
1 选用耐水色谱柱
2 可以试试加保护柱
4楼2008-10-05 16:44:09
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