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huanhui8786

新虫 (小有名气)

[交流] MTT实验问题 加入DMSO后紫色结晶溶解后变成了红褐色

做MTT实验,加入DMSO后可见部分溶解的结晶,呈现紫色,但是用移液枪吹打混匀后,颜色变成了红褐色;用酶标仪的shaking功能混匀10分钟后也是红褐色。
另外一块板中多数呈现红褐色,但是有几个孔呈现除了正常的紫色(图片中蓝色标记)。
MTT实验我做了很多次,以前都是很正常的紫色,用酶标仪Scan模式测试,紫色的最大吸收波长在550nm,红褐色的最大吸收波长在500nm左右。
我有几个问题想不清楚,麻烦有做过的虫友帮忙,谢谢!
1.由于有个别孔还是出现了正常的紫色,是否说明不是MTT、DMSO、培养基、血清、PBS的原因呢?
2.对照组(最左边一列)也出现了红褐色,是否说明不是我加入的纳米粒子发生的作用?
3.出现紫色的孔是随机分布的,会是染菌的原因吗?出现红褐色的孔都染菌了?
4.做实验之前细胞培养室和培养箱都用75%清理消毒过,也执行了培养箱自带的灭菌程序,MTT实验我做过很多次,都很正常,按理来说不会出现操作引起的污染,还有那些因素会导致污染呢?

MTT实验问题 加入DMSO后紫色结晶溶解后变成了红褐色
图片1.jpg
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神经再生

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
huanhui8786: 金币+1 2015-12-24 08:31:21
碰到过变成红褐色的情况,后来发现是我们培养的某种细胞所特有的。不过还没碰到过一种细胞有两种颜色的情况

发自小木虫Android客户端
也许似乎大概是,然而未必不见得。
6楼2015-12-23 22:25:39
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huanhui8786

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 神经再生 at 2015-12-23 22:25:39
碰到过变成红褐色的情况,后来发现是我们培养的某种细胞所特有的。不过还没碰到过一种细胞有两种颜色的情况

我养的是hela细胞,不过细胞有好多碎片,请问你用的那种细胞会产生红褐色呀?
7楼2015-12-24 08:31:05
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神经再生

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by huanhui8786 at 2015-12-24 08:31:05
我养的是hela细胞,不过细胞有好多碎片,请问你用的那种细胞会产生红褐色呀?...

BEAS-2B

发自小木虫Android客户端
也许似乎大概是,然而未必不见得。
9楼2015-12-25 08:12:05
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若燚

金虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
huanhui8786: 金币+2, 我试试,非常感谢! 2015-12-25 08:39:10
楼主,我之前也遇到过类似情况,我做的这个实验培养基对DMSO和甲瓒的溶解有很大影响,有一次培养基个别孔没有吸干净,加入DMSO溶解后就是你这种颜色,其余正常为紫色。可能是这个原因,希望可以帮到你。

发自小木虫IOS客户端
10楼2015-12-25 08:21:21
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