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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » SDS-PAGE 跑蛋白胶出了问题
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~春梦秋云~

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-23 09:42:44
1.胶的问题，配的胶不均匀。预制胶没混匀。
2.点样孔有问题，样品没点进去
3.样品没处理好，比如是破碎沉淀，会飘出来的
4.换新的缓冲液。
5，重新配胶，混匀在加入玻璃板中，在培养箱中凝固（冬天冷），电泳槽 ...

我配的10倍的电泳缓冲液，挺好的。稀释成一倍用来跑电泳，电泳液里好像是SDS有析出，不知道是什么问题？

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相信黎明不会失约，相信付出必有回报！
11楼2015-12-24 01:06:40
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sweetcoffei

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
对于中间靠右的两个样品，我认为主要应该是样品本身的问题，很可能蛋白质较少，大部分为多糖或糖脂，因此不能被考马斯兰染色，且浓度较大挤压旁边泳道出现上述结果，可尝试用丙酮沉淀样品后再跑。
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12楼2015-12-24 08:39:43
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XMC-7

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请问样品在什么Buffer中？依次说一下呢
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能帮的帮，难事求助的心情咱也经历过
13楼2015-12-24 12:53:36
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真想不起来名

银虫 (小有名气)
胶没凝好

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14楼2015-12-24 12:57:18
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青苹果QT

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by ~春梦秋云~ at 2015-12-22 17:31:41
一般都是等一个多小时以上。
...

一个多小时有点久的吧，我做的胶一般二十多分钟就凝了
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15楼2015-12-24 13:05:54
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虫虫笑了

木虫 (小有名气)
估计是胶没做好的原因，以前我也出现过这样的情况，但是后来多让他放一会儿就好多了
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1111
16楼2015-12-24 13:20:19
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶可能有问题，但感觉样品的问题更大，减少下上样量，注意下样品处理
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17楼2015-12-24 14:46:54
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fire19881011

木虫 (著名写手)
胶不均匀～制胶的时候溶液没有混匀就加进去了！

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18楼2016-04-14 00:54:22
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沉默、颜泪

木虫 (正式写手)
原因可能有两个:1、胶的问题，不过看你其他条带跑的不错，可能性小。2、样品里面的杂质太多。建议你跑胶的时候，在中间的空白孔内加入高浓度的上样缓冲液。

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19楼2016-04-16 09:15:23
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simakaixue

银虫 (小有名气)
胶没配好

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20楼2016-04-16 09:19:53
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