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上官abc

金虫 (正式写手)

王下七武海

[交流] 菌液pcr有两条带

如图，出现两条带是怎么回事？

菌液pcr有两条带


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1楼 2015-12-18 00:17:09
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ld梁冬

铜虫 (小有名气)
你没做对照吗

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2楼2015-12-18 07:18:08
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吗子

金虫 (小有名气)
★
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可能是引物的部分片段扩增出来的，下次做菌液PCR的时候你可以做个阳性对照，只要有目的条带不影响实验结果就行。
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深秋
3楼2015-12-21 10:44:22
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Deng_Cheng

铁虫 (小有名气)
★
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3楼: Originally posted by 吗子 at 2015-12-21 10:44:22
可能是引物的部分片段扩增出来的，下次做菌液PCR的时候你可以做个阳性对照，只要有目的条带不影响实验结果就行。

请问阳性对照怎么做呀？
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4楼2015-12-21 12:39:25
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371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿
★
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提高退火温度看看

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5楼2015-12-21 12:47:27
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足下客

木虫 (正式写手)
★
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引物特异性不好。不知道哪条是你的目的条带，两条带离得太近，不太容易割胶分开。
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6楼2015-12-21 14:48:23
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吗子

金虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by Deng_Cheng at 2015-12-21 12:39:25
请问阳性对照怎么做呀？...

根据你的具体实验，比如你的目的片段是从T载体上切下来的，那以含T载体的细菌为模板，相同的体系和反应条件，即为阳性。
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深秋
7楼2015-12-21 15:56:44
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小飞飞XF

金虫 (小有名气)
★
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我也出现这样的问题了，刚刚，你现在知道原因了嘛？求解啊

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8楼2017-06-09 15:04:15
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矮腿妹的烦恼

新虫 (初入文坛)
可能不是单克隆

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9楼2017-06-09 21:42:47
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宁文峰

新虫 (小有名气)
★
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用质粒再p一次，注意浓度不要太高，还是两天带就测序，证实一下

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所追求的不在明天，而在现在以前
10楼2017-06-09 22:08:28
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