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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 电化学 » 电化学传感器 » 为什么标记在DNA的亚甲基蓝的电化学信号不断降低？谢谢大家了！
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letliufly

金虫 (小有名气)

[求助] 为什么标记在DNA的亚甲基蓝的电化学信号不断降低？谢谢大家了！ 已有2人参与

传统电化学生物传感，利用标记在DNA上的亚甲基蓝作为电信号分子（DNA另外一端标记有巯基用于修饰在金电极上）。 原理中，应该目标物出现，亚甲基信号升高。但是，当加入目标DNA的时候，亚甲基蓝信号却降低了好几倍。请问这是什么原因？？？（DNA杂交是在HEPES溶液里面。电信号扫描是在Tris-HCl溶液里，pH=7.4）
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人生就是坚持！！！
1楼 2015-12-11 10:23:36
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letliufly

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by olea at 2015-12-11 15:56:57
竞争上去还稍微简单点，要竞争下来的话电极表面的目标DNA浓度要很大才行，特别是亲和力相差不是非常大的时候。
有一种可能是目标DNA直接吸附上去了，不但没弄下来先上去的那个DNA反而增大的了电极的电阻。...

但是这之前先用了1 mM的MCH封闭了电极。同时电阻变小，显示DNA被竞争走了
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人生就是坚持！！！
9楼2015-12-11 18:09:39
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cqzhangzhang

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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letliufly(pengtao1203代发): 金币+3 2015-12-12 00:45:36
无非俩原因，修饰不牢固和杂交不成功。要解决这俩问题难得很。也就是说这俩问题是电化学核酸传感器的技术瓶颈。
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2楼2015-12-11 14:15:46
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olea

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
letliufly(pengtao1203代发): 金币+25 2015-12-12 00:45:12
你的信号分子是先修饰到电极上的是吧，是假定没上去目标DNA的时候是远离电极表面的，然后设计目标DNA上去后拉近电极表面的原理吗？
这个方法有些问题，因为单链DNA不是刚性的，有可能开始的时候信号分子就接近表面了。还要一个问题是有可能上去的目标DNA多了也会一定程度阻碍电极表面电荷传递。
后来别人改进的就是用个稍微长点的链，开始假设是接近表面的，然后目标上去后双链有一定刚性，拉直了后信号分子远离，这个稍微好一点。
当然了刚开始做有个问题是如果有部分信号分子是吸附上去的，在杂交的过程中脱落也是有可能的。
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3楼2015-12-11 14:31:09
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letliufly

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cqzhangzhang at 2015-12-11 14:15:46
无非俩原因，修饰不牢固和杂交不成功。要解决这俩问题难得很。也就是说这俩问题是电化学核酸传感器的技术瓶颈。

跑电泳是显示杂交成功的。修饰不牢固的话，那该怎么弄呢
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人生就是坚持！！！
4楼2015-12-11 15:34:21
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