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牛犇2010

新虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR求助 已有2人参与

我是小白,求问跑荧光定量PCR出现如下图所示,是什么问题?

荧光定量PCR求助


荧光定量PCR求助-1


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牛犇2010

新虫 (小有名气)

2楼2015-12-08 17:29:40
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牛犇2010

新虫 (小有名气)

3楼2015-12-08 17:44:59
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兽医做科研

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个跑的是原液还是稀释过呢,是不是增大模板浓度可以好点

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4楼2015-12-08 17:47:12
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牛犇2010

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 兽医做科研 at 2015-12-08 17:47:12
这个跑的是原液还是稀释过呢,是不是增大模板浓度可以好点

和原液于稀释也没关系吧,就是没有扩增的灵光信号,PCR产物是有,跑了电泳,是有条带的

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5楼2015-12-08 17:51:48
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兽医做科研

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 牛犇2010 at 2015-12-08 17:51:48
和原液于稀释也没关系吧,就是没有扩增的灵光信号,PCR产物是有,跑了电泳,是有条带的
...

内参有值吗,你可以增加一下浓度试试,只是建议

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6楼2015-12-08 22:36:09
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胡亚梅

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这是跑完之后的显示的扩增曲线吗?怎么看着像刚开始的本地荧光信号呢,还有,看看你关于扩增曲线显示的方式对不对,我记得有什么l线性,还有log的。都试试
小虫虫~~
7楼2015-12-09 09:05:11
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牛犇2010

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 胡亚梅 at 2015-12-09 09:05:11
你这是跑完之后的显示的扩增曲线吗?怎么看着像刚开始的本地荧光信号呢,还有,看看你关于扩增曲线显示的方式对不对,我记得有什么l线性,还有log的。都试试

我跑的是三重体系,其他两断基因都跑出来了,没有上图,第三个一直没出来,我这是是的单个体系,结果一直这样,pcr产物跑了凝胶,也有条带,我觉得引物应该没问题,信号应该也没问题,可能是探针融合的问题,下一步打算和师兄商量重设计引物,重合成。希望下次能成功

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8楼2015-12-09 09:45:26
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