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liling0601

铜虫 (小有名气)

[求助] 载体构建已有3人参与

我通过高保真酶扩的两个4000+bp的序列,但是怎么都连接不到PGBKT7,或者Pcambia1301的载体上,麻烦有经验的各位给点建议,我用的是takara的T4连接酶,16度16小时或者24小时 4度过夜或者3天都连过,就是连不上,连上的菌液验证不出来,酶切多了个三千的条带或者是提出的质粒木有条带
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王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我只能说如果片段长了不好连接到载体上,可以在片段中部寻个酶切位点分开两段依次连接,我只是提供个思路,具体实验流程还要好好谋划谋划,我没有连过这么长的。
没有做不到,只有想不到!
2楼2015-11-30 11:51:19
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