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[交流]
lncRNA的表达载体构建 已有3人参与
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小弟有个问题：编码蛋白的mRNA是有读码框的，因此构建某一个蛋白的过表达载体只需要将其对应的 ORF插入到载体如pcDNA3.1中。但是lncRNA是没有读码框的，因此构建一个lncRNA的过表达载体，需要注意哪些问题？ 问题1：即怎么确定其要插入到载体中的lncRNA序列？其5’端和3‘端的具体位置怎么确定？根据什么？ 问题2：lncRNA也有类似于ORF的元件吗？ 问题3：选择什么载体合适构建lncRNA过表达载体？ 问题4：有些lncRNA有polyA尾巴，有些则没有，怎么通过RT-PCR扩增lncRNA? 哪位大神交流下？  |
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