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mcdfish

新虫 (初入文坛)

[求助] PBMC提取时抗凝剂的选择和红细胞过多的疑问

最近在提PBMC。不知道选择什么样的抗凝剂好。
我也很纠结,我又要提RNA,又要做凋亡,还要做流式。RNA不能用肝素钠,凋亡不能用EDTA,但是我一直用的是肝素钠的,因为后续还要培养几天,不知道有没有影响。求正解。

另外,我用人的试剂盒提取牛的PBMC, 调整了转速,3000rpm,10min,但是感觉明显红细胞比较多,用3500rpm的10min和3000rpm15min三者没有什么差异。不知道原因处在哪里。

想用裂解液裂解红细胞,又怕对凋亡和流式产生影响。有哪位大侠可以解答下?

小妹先谢过了。
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