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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR扩增产物，出现拖尾现象，
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lvshilu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
降低曝光率，提高退火温度。
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需要金币
11楼2015-11-23 09:41:40
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S一缕阳光h

木虫 (著名写手)
拖尾是有非特异性的产物产生，你可以考虑加样是否有问题

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12楼2015-11-23 09:57:44
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风铃永不孤单

银虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by S一缕阳光h at 2015-11-23 09:57:44
拖尾是有非特异性的产物产生，你可以考虑加样是否有问题

我想问一下，PCR非特异性扩增，对后续的DGGE会不会有影响呢？？？
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13楼2015-11-23 11:42:00
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S一缕阳光h

木虫 (著名写手)
这个不是很清楚～不好意思

发自小木虫Android客户端
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14楼2015-11-23 13:11:21
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风铃永不孤单

银虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by S一缕阳光h at 2015-11-23 13:11:21
这个不是很清楚～不好意思

恩，没事，其实跑DGGE的时候，上样量是无法控制的，就算移液枪很标准，但是往上样槽里打的时候，也可能会飘出来的~所以DGGE这是一个定性的手段，而不能定量，不能只考虑条带的明暗来反应该种群数量的多少~
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15楼2015-11-23 13:27:16
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种草实验

新虫 (初入文坛)
前4个出现非特异性扩增，拖尾较严重，目的条带较亮，建议考虑提高褪火温度，预实验可以2℃的梯度实验。
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16楼2016-01-09 17:35:43
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