24小时热门版块排行榜    

查看: 7986  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

风铃永不孤单

银虫 (小有名气)

[求助] PCR扩增产物,出现拖尾现象, 已有2人参与

前天的时候,我用冻融后的DNA模板,抽取1ul稀释20倍,进行PCR扩增后,进行琼脂糖电泳,发现有几个样品扩增的比较弱,重新扩增后,还是较弱。分析原因可能是原始的DNA样品在冻融后可能会出现DNA分布不均匀现象。
今天,对原始DNA样板进行重新稀释20倍(原始DNA样板冻融后,充分混合,抽取1ul稀释20倍),进行PCR扩增后,进行琼脂糖电泳。果然都扩出来了,而且特别的亮。但是问题又来了,拖尾比较严重,敢问哪位知道造成这种情况的原因是什么???附上图

PCR扩增产物,出现拖尾现象,
1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xushiqi001

新虫 (小有名气)

减少酶量,减少循环数,提高退火温度。

发自小木虫Android客户端
7楼2015-11-20 22:45:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

风铃永不孤单

银虫 (小有名气)

减小循环次数是不是也可以避免拖尾
2楼2015-11-20 21:17:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuxinyueer

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1,2,3,4拖尾中明显有非特异性扩增,建议提高退火温度
另外拖尾可能的原因为:1.有杂质。2.上样浓度高
欢迎讨论,小木虫未能及时回复,请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
3楼2015-11-20 21:22:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风铃永不孤单

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liuxinyueer at 2015-11-20 21:22:14
1,2,3,4拖尾中明显有非特异性扩增,建议提高退火温度
另外拖尾可能的原因为:1.有杂质。2.上样浓度高

若出现非特异性扩增,那可以用P的产物进行DGGE吗?跑出来的DGGE,可不可行?
4楼2015-11-20 21:24:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 302求调剂 +3 锦衣卫藤椒 2026-03-25 3/150 2026-03-25 15:05 by Linda Hu
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +17 陌の森林 2026-03-18 17/850 2026-03-25 11:26 by greychen00
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 0703化学求调剂 +6 奶油草莓. 2026-03-22 7/350 2026-03-25 10:00 by shangxh
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +15 吃吃吃才有意义 2026-03-19 16/800 2026-03-24 19:51 by 了了了了。。
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +3 SYA! 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:09 by macy2011
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +5 葵梓卫队 2026-03-18 7/350 2026-03-23 16:26 by lingjue
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见