| 查看: 2424 | 回复: 7 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
etb1木虫 (正式写手)
|
[交流]
用transwell做细胞迁移实验，求教 已有4人参与
|
||
|
我的实验步骤大致是这样的： 1. Hela细胞与药物在培养瓶中共同孵育24小时 2. 移除原培养基，用无血清培养基洗涤几次；用胰酶消化并用无血清培养基收集细胞 3. 向transwell（8微米孔径）下室加600微升含10%FBS的培养基，上室加入200微升细胞悬液；孵育24小时 4. 移除上、下室的液体 5. 下室加入600微升4%多聚甲醛固定细胞半小时 6. 移除多聚甲醛，用棉签擦除未穿过膜的细胞 7. 下室加入600微升0.1%结晶紫染色10分钟 8. 用PBS洗涤小室 9. 在显微镜下观察细胞并计数。 由于我做的是细胞迁移实验而不是侵袭实验，所以没加基质胶。请大家帮我看看，我的实验步骤有没有错误或需要改进的地方？ 另外我还有不懂的问题想请教。transwell小室中的那个膜是半透膜吗？如果不是的话，8微米孔径对FBS来说是很大的，上下室FBS浓度不同，下室FBS不久会很快扩散到上室而达到浓度平衡了吗？这样的话，上室细胞还怎么迁移到下室？ 我是做transwell实验的新手，请大家多多指点。 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有7人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有7人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有9人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有11人回复
5楼2016-01-23 20:39:48
etb1
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1904.1
- 散金: 773
- 红花: 8
- 帖子: 564
- 在线: 116.8小时
- 虫号: 1136866
- 注册: 2010-11-02
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
2楼2015-11-23 20:50:29
siriusxuan
木虫 (正式写手)
- 应助: 50 (小学生)
- 金币: 1830
- 散金: 207
- 红花: 7
- 帖子: 509
- 在线: 151.5小时
- 虫号: 1992629
- 注册: 2012-09-11
- 专业: 生物化学
3楼2015-11-24 09:16:01
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
我也是24孔板，可是一般不是只能看到小室上室的细胞吗？所以显微镜调节是可以看到24底部的细胞的？喔本来还在想是不是要先把小室拿出来才能看呢，谢谢 发自小木虫IOS客户端 |
7楼2016-01-24 22:00:30
40