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zxzy516518

新虫 (初入文坛)

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[交流] 测总黄酮

各位大侠，本人想做个正交试验测枳壳中的总黄酮，以总黄酮量为指标，请问下对照品可以用芦丁嘛，若是的话，用多少浓度的醇溶？显色剂用什么合适，是三氯化铝，醋酸钾还是用NaNO2、Al（NO3）、NAOH呢？我查了一些文献大都是后面的显色剂。还有我的枳壳中没有文献报道过其中有含芦丁，不过其中的有柚皮苷。先谢了！！！
[search]总黄酮芦丁[/search]

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1楼 2008-09-16 14:24:29

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jyan1978

金虫 (小有名气)

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性别: MM
专业: 中药制剂

★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！

总黄酮的测定
A.1 试剂
A.1.1 聚酰胺粉
A.1.2 芦丁标准溶液：
称取5.0mg芦丁，加甲醇溶解并定容至100ml，即得50μg/ml。
A.1.3 乙醇：分析纯。
A.1.4 甲醇：分析纯。
A.2仪器
A.2.1 比色计
A.2.2 层析柱
A.3实验步骤
A.3.1 试样处理：称取一定量的试样，加乙醇定容至25ml，摇匀后，超声提取20min，放置，吸取上清液1.0ml，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用20ml苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25ml。此液于波长360nm测定吸收值。同时以芦丁为标准品，测定标准曲线，求回归方程，计算试样中总黄酮含量。
A.3.2 芦丁标准曲线：
吸取芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于10ml比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm比色。求回归方程，计算试样中总黄酮含量。

A.4 计算和结果表示：

X=AⅩV2Ⅹ100/V1ⅩMⅩ1000
式中：
X—试样中总黄酮的含量，mg/100g；
A—由标准曲线算得被测液中黄酮量，μg；
M—试样质量，g；
V1—测定用试样体积，ml；
V2—试样定容总体积，ml。
计算结果保留二位有效数字。