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小小鹭

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 106.6
散金: 49
帖子: 85
在线: 50小时
虫号: 3035740
注册: 2014-03-10
性别: MM
专业: 环境工程

[求助] 土壤脲酶活性测定，计算的时候，分取倍数怎么算已有3人参与

我的试验方法：
试剂：1）甲苯
2）10%尿素：称取10g尿素，用水溶至100ml。
3）柠檬酸盐缓冲液（PH6.7）：184克柠檬酸和147.5克氢氧化钾溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/LNaOH将PH调至6.7，用水稀释至1000毫升。
4）苯酚钠溶液（1.35mol/L）：62.5克苯酚溶于少量乙醇，加2毫升甲醇和18.5毫升丙酮，用乙醇稀释至100毫升（A），存于冰箱中；27克NaOH溶于100毫升水（B）。将AB溶液保存在冰箱中。使用前将2溶液各20毫升混合，用蒸馏水稀释至100毫升。
5）次氯酸钠溶液：用水稀释试剂，至活性氯的浓度为0.9%，溶液稳定。
6）氮的标准溶液：a 精确称取0.4717克硫酸铵溶于水并稀释至1000ml，得到1ml含有0.1mg氮的标准液
标准曲线绘制：吸取配置好的氮溶液20ml，定容至100ml，即稀释了5倍，吸取1，3，5，7，9，11，13ml移至50ml容量瓶，加水至20ml，再加入4ml苯酚钠，仔细混合，加入3ml次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟,用水稀释至刻度。将着色液在紫外分光光度计上于578nm处进行比色测定，以标准溶液浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标绘制曲线图。
1) 称取10g过1mm筛的风干土样于1000ml容量瓶中。
2) 向容量瓶中加入1ml甲苯（以能全部使土样湿润为度）并放置15分钟
3) 之后加入10ml 10％尿素溶液和20ml柠檬酸缓冲液（PH6.7），并仔细混合
4) 将容量瓶放入37摄氏度恒温箱中，培养24h
5) 培养结束后，用热至38摄氏度水稀释至刻度，仔细摇荡，并将悬液用致密滤纸过滤于三角瓶中。
6) 显色：吸取3ml滤液于50ml容量瓶中，加入7ml蒸馏水，充分震荡，然后加入4ml苯酚钠，仔细混合，再加入3ml次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟，用水稀释至刻度，溶液呈现（青定）酚的蓝色。
7) 1h内在（（青定）酚的蓝色在1h内保持稳定）在分光光度计上用1cm液槽，于578nm处将显色液进行比色测定。
8) 无土对照：不加土样，其他操作与样品实验相同。以检验试剂纯度，整个实验设置一个对照
9)无基质对照：以等体积的水代替基质，其他操作与样品实验相同。每个土样都设此对照。
结果计算：土壤脲酶活性以24小时后100g土壤中NH3－N的毫克数表示。
M＝（X样品－X无土－X无基质）*v*n / m
式中：M－土壤脲酶活性值
X样品――样品实验的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数
X无土――无土对照实验中的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数
X无基质――无基质对照实验中的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数
V——显色液体积
n——分取倍数
m——土重

n怎么计算，这个实验中的分取倍数是多少。

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1楼 2015-11-17 11:07:31

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种种具消散

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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注册: 2015-12-24
性别: MM
专业: 环境污染化学

【答案】应助回帖

楼主，我们现在也正在测土壤中的脲酶活性，毕业实验。遇到一些问题，所以，想问问你，计算公式M＝（X样品－X无土－X无基质）*v*n / m，为什么要乘以v？我以前遇到的相似的计算都是不用乘以v的。我还在小木虫网站上看到其他的计算方法，也是不用乘以v的http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5588254&fpage=1&target=self&page=1。另外，土壤脲酶活性你不是用以24小时后100g土壤中NH3－N的毫克数表示的吗，干嘛还要除以m，不是乘以100/10=10吗？即使要除以m，最后还是要乘以100啊。还有，次氯酸钠是用来干嘛的？我们定的次氯酸钠有效氯>=6%，怎么稀释成活性氯=0.9%的溶液？另外，我们配制A液取苯酚的时候，很难取。最后用热水融化，再到62.5g的苯酚来用。这和方案上的用量没什么不同吧？离发帖时间隔得有点久，求大神求助