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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 纳米生物材料 » 论文外审专家意见答复，急求大神帮忙给予解答，谢谢
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daivid

木虫 (小有名气)

[求助] 论文外审专家意见答复，急求大神帮忙给予解答，谢谢 已有3人参与

本论文是关于靶向入脑的纳米材料制备验证，其中我们用了适配体TTA1进行修饰，同时纳米材料带有cy5.5-NHS荧光标记，目前论文已外审返回，表示可接受，但需做些解答，以下两个问题本人知识浅薄，特请大神帮忙解惑，感激不尽！
1、The method used in the coupling of the TTA1 to the NP appears to be through a disulfide bond.  It would be important to determine how stable the disulfide linkage is in plasma as it could be subject to metabolism via a glutathione adduct.
我们课题组以前也发表过类似论文，但未用TTA1，专家也未提二硫键的稳定性问题，此处不知该如何作答，本人非化学材料相关专业，实在无从下手，也不想补充实验，谢谢！

2.The distribution of the NPs to the brain and other organs is based on the fluorescence levels from Cy5.5, it is therefore necessary that the Cy5.5 linkage to the NP is stable in vivo, and that the fluorescence signal seen in the brain is from the intact NP linked to Cy5.5.
荧光染料与纳米粒子结合标记后，若不稳定，一旦在体内脱落，还会发光吗？还有纳米粒进入体内或大脑后，是否还完整，这能验证吗？请大神们帮忙解答，不想补充实验，也不知该怎么补充，毕业着急，谢谢！
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1楼 2015-11-17 01:22:53
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01102

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
daivid: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-11-21 20:15:21
看来你遇到内行专家了，第一个问题，其实就是要你补做个干扰实验，验证GSH对你材料的干扰的大小，第二个问题，体内实验没有做过，我也不懂解答
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2楼2015-11-17 10:11:28
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daivid

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 01102 at 2015-11-17 10:11:28
看来你遇到内行专家了，第一个问题，其实就是要你补做个干扰实验，验证GSH对你材料的干扰的大小，第二个问题，体内实验没有做过，我也不懂解答

这个实验麻烦吗，一定非做不可吗，是不是，如果有文献做过类似实验，可否直接用文献说明这是稳定的

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3楼2015-11-17 11:03:11
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01102

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by daivid at 2015-11-17 11:03:11
这个实验麻烦吗，一定非做不可吗，是不是，如果有文献做过类似实验，可否直接用文献说明这是稳定的
...

文献的材料的性质不一定和你的一样呀，引文献不好说明，最好补实验，看结果更有说服力，你就配不同浓度的GSH溶液，然后加入你的材料，看看GSH对它有没有干扰，破不破坏他们的双硫键就可以了，看看哪种的浓度干扰最小
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4楼2015-11-17 12:01:06
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dongge0101

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
daivid: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-11-21 20:14:01
1, GSH在血清中的浓度比在血细胞中的浓度低很多，如果材料是纳米粒子的话，可以直接分散在FBS中37度恒温振荡模拟体内环境测不同时间点粒径的变化，就用DLS测。多肽接在材料表面应该会使粒径增加，只要粒径在血清中保持不变，就能说明二硫键的稳定性。2，cy5.5在体内脱离纳米粒子后也一样会发光，你用的是cy5.5-NHS, 是与纳米粒子表面氨基作用，形成的酰胺键在生理条件下是很稳定的。
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希望能在论坛里与各位志同道合的朋友探讨专业知识，交流实验心得，分享学术资源，共同勉励，一起进步。
5楼2015-11-21 03:22:19
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daivid

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by dongge0101 at 2015-11-21 03:22:19
1, GSH在血清中的浓度比在血细胞中的浓度低很多，如果材料是纳米粒子的话，可以直接分散在FBS中37度恒温振荡模拟体内环境测不同时间点粒径的变化，就用DLS测。多肽接在材料表面应该会使粒径增加，只要粒径在血清中保 ...

非常感谢！

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6楼2015-11-21 20:13:29
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mrwang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1、aptamer通过S-S与纳米粒子连接，请问是那种类型的粒子？在模拟环境下如果S-S断裂则会有aptamer释放出来，分离纳米粒子之后如果检测不到游离的aptamer即可证明S-S稳定，如PAGE，UV方法都可以；
2、Cy5.5本身就可以在光激发下发射荧光。酰胺键非常稳定，这个可以不用补实验，说明回应即可。

不想补实验的话最好找同类文献或实验证明
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世界人民大团结万岁！
7楼2015-11-24 10:23:51
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