| 查看: 2532 | 回复: 27 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
标曲溶解曲线单一峰，但梯度稀释后，Ct值基本无差别，线性很差，扩增效率高的吓人已有1人参与
|
||
如图，不知道是怎么回事啊，理论上，不同梯度的浓度的质粒的Ct值是有差别的，可以分开的啊。我做的另一个基因是可以分开的，为什么这个的Ct值都在一起呢。我是按1ul+9ul稀释的。扩增条件是：94℃预变性4min，45个循环为94℃变性45s，61℃退火45s,72℃延1min，最后再在72℃延伸20min。体系是：引物10uM各 1ul，mix12.5，双蒸水10，模板1ul（10ng/ul）. 新手求助！急！！急！！急！！ 1.png  2.png  3.png |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有55人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
11楼2015-11-05 21:13:59
2楼2015-11-05 15:26:52
3楼2015-11-05 15:32:42
wjf7862203
铁虫 (小有名气)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 1634.9
- 散金: 1
- 红花: 1
- 帖子: 81
- 在线: 36.4小时
- 虫号: 1169295
- 注册: 2010-12-13
- 性别: GG
- 专业: 基础兽医学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
二月smile: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-11-05 16:41:50
感谢参与，应助指数 +1
二月smile: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-11-05 16:41:50
|
没有稀释好，标准曲线，稀释很关键，稀释好就是成功一半了。1ul+9ul稀释很不好稀释，量太少了，建议你加大稀释体积20ul+180ul。稀释时注意混匀，枪头用进口的吸的准一些，稀释液可以考虑用TE 发自小木虫Android客户端 |
4楼2015-11-05 15:59:22