应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为什么我做出来的细菌V3区通用引物338，518，PCR扩增出来的片段是100bp?
91/1返回列表
查看: 4040  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

runye2015

新虫 (小有名气)

[交流] 为什么我做出来的细菌V3区通用引物338，518，PCR扩增出来的片段是100bp?

如题，
以下是引物序列
16SrDNA 338F:CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGCACGGGGGG(GC夹) CCTACGGGAGGCAGCAG
               518R:ATTACCGCGGCTGCTCC
1、1.5%的琼脂糖，120V 30分钟，
2、下图是引物刚刚合成以后做的温度PCR，中间为 MARKER 500-25BP 依次是 500 400 300 200 150 100 75 50 25 ，最亮的为200bp
根据灰度值确定最佳的退火温度为62度，但是所有的温度对应的条带都在100bp左右。
3、正常应该是多大呢？是引物序列的问题吗？
求各位大神指点！万分感谢！

为什么我做出来的细菌V3区通用引物338，518，PCR扩增出来的片段是100bp?
细菌V3通用引物228,518 温度梯度PCR.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-10-28 16:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

runye2015

新虫 (小有名气)
请各位大神帮忙！不胜感激！！谢谢啦！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2015-10-28 22:41:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stl409
3楼2015-10-28 23:22:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangneal

新虫 (初入文坛)
上样多少

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

runye2015
4楼2015-10-28 23:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

runye2015

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangneal at 2015-10-28 23:27:39
上样多少

上样量20微升～

发自小木虫Android客户端
回复此楼
5楼2015-10-29 07:19:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

runye2015

新虫 (小有名气)
好吧

发自小木虫Android客户端
回复此楼
6楼2015-10-29 22:45:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hardy_guo

铁虫 (小有名气)
呵呵

发自小木虫Android客户端
回复此楼
7楼2015-10-29 22:51:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

runye2015

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by hardy_guo at 2015-10-29 22:51:52
呵呵

呵！

发自小木虫Android客户端
8楼2015-10-31 08:29:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18245728523

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
您好，请问您用的这个引物是参考哪个文献获得的？可否告知一下文献链接？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
好好学习，天天向上
9楼2017-03-27 20:22:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 runye2015 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 7lpolszZVXgi 2026-08-14 6/300 2026-08-15 09:28 by sunzitan
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +24 医学老男孩 2026-08-13 50/2500 2026-08-15 06:38 by 学员8dgXkO
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭