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为什么我做出来的细菌V3区通用引物338，518，PCR扩增出来的片段是100bp?
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如题， 以下是引物序列 16SrDNA 338F:CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGCACGGGGGG(GC夹) CCTACGGGAGGCAGCAG 518R:ATTACCGCGGCTGCTCC 1、1.5%的琼脂糖，120V 30分钟， 2、下图是引物刚刚合成以后做的温度PCR，中间为 MARKER 500-25BP 依次是 500 400 300 200 150 100 75 50 25 ，最亮的为200bp 根据灰度值确定最佳的退火温度为62度，但是所有的温度对应的条带都在100bp左右。 3、正常应该是多大呢？是引物序列的问题吗？ 求各位大神指点！万分感谢！  细菌V3通用引物228,518 温度梯度PCR.jpg |
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