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非变性聚丙烯酰胺电泳染色 已有3人参与
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请问各位大侠，我电泳的胶，染色后倒入显色液的瞬间就全部变黑了是怎么回事呢，重新试过几次，还是一样的效果，这个什么原因导致的？？？？请教一下大家啊，实在是不知道原因。 201408101436503082.jpg |
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mzjfriend
木虫 (小有名气)
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一、银染前准备 1. 银染水质很重要，最好全部双蒸水或去离子水。 2. 装胶的器皿清晰干净，最后双蒸水多冲几遍。 3. 操作时戴手套，不然gel上会有大手印。 4. 跑胶时我采用大梳子，小样本量。因为银染本身分辨率就很高，样本量太大时杂带太浓。小梳子的条带比较模糊。如图 二、银染过程 1. 电泳结束后，自来水冲洗玻璃板两面，预冷，剥下凝胶，双蒸水洗涤两次。 2. 浸没于0.1% 的AgNO3溶液中，摇床银染10分钟。 注意事项： a. 时间。银染时间可延迟到15分钟，但是千万不要超过20分钟，否则胶的背景极深，一个字，丑。 b.浓度。硝酸银溶液浓度不宜超过0.15%，我的经验表明，AgNO3浓度越高，胶越黄越丑。 3. 双蒸水冲洗两次，1min。 注意事项： a. 充分的漂洗可以降低背景色。因此漂洗时间一定要到1min 4. 浸没于1.2% NaOH+ 0.4% 甲醛溶液中显影，看到模糊的条带后立即大量双蒸水冲洗，中止显影。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2015-10-26 23:12:31
2楼2015-10-25 21:05:46
3楼2015-10-25 21:07:56
4楼2015-10-26 18:50:27
