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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 使用核酸染料GOLDEN VIEW,琼脂糖胶背景是白色
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hs2451

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by tianyuan00 at 2015-10-29 13:56:07
我的也是这种情况，借了别的实验室的染料，效果很好，怀疑自己的染料有问题。

请问借的什么染料？确定没再出现这问题吗？
我用的是Gelred，似乎不是原装的，一直跟楼主这一样。就感觉那边白色区域的前沿是一条线，跟DNA运动方向一向，距离与电泳时间有关。一直在考虑换染料。。
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中国是不朽的
11楼2015-11-10 20:40:33
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hs2451

木虫 (正式写手)
同求。想问下楼主的PCR是用的Kit还是只用Mix还是体系全都单加的？
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中国是不朽的
12楼2015-11-10 20:41:54
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hs2451

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yunzhifei at 2015-10-25 20:50:47
染料使用量过多，拍照时曝光时间过长，都会这样的。拍照时凝胶成像仪应该是可以调整背景的明暗度的，找找吧。

感觉不是，我的也这样，您注意到他的引物和产物前面都不怎么亮没有？我怀疑是染料分布不均匀，不知有无是这种可能？
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中国是不朽的
13楼2015-11-10 20:43:15
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zhrmghg人民

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

制胶有问题，特别注意温度，不怎么烫手的时候加入染料，这个问题刚开始做实验室遇到过

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相信自己！
14楼2015-11-11 10:41:12
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hs2451

木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by zhrmghg人民 at 2015-11-11 10:41:12
制胶有问题，特别注意温度，不怎么烫手的时候加入染料，这个问题刚开始做实验室遇到过

bingo!谢谢！
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中国是不朽的
15楼2015-11-16 21:19:02
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generalel

金虫 (小有名气)
凝胶太干。

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16楼2015-11-16 23:31:28
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joeming123

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1.胶的时间放着太长， 配胶后20min左右，就要上样，电泳120v，25min。
2.曝光时间过长，缩短曝光时间
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现在的路越来越难走
17楼2015-11-17 11:22:25
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弘沫沫之蛋挞

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们实验室也有这个情况，我们把跑过的胶的胶孔倒过来180度放接着跑电泳10分钟，然后发现亮的胶的区域只存在于中间部分。说明这个染料朝着胶外的方向移动，不亮的那部分是跑出胶的区域了。我们怀疑是染料的问题，准备买新的呢
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18楼2015-12-25 15:52:15
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