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wuyuanqing金虫 (正式写手)
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[求助]
重组质粒的验证 已有2人参与
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| 各位大侠，本人最近做一个克隆，转化后挑取单克隆，LB摇菌后，进行菌液PCR，引物为我克隆基因的上下游引物，结果显示，有两个克隆出现目的大小条带，而且亮度很大（远远高于marker中最亮的条带），于是信心满满地提取质粒进行酶切验证，结果，电泳显示无任何条带，将质粒上样后也五条带，怀疑是试剂盒的问题后，换一种试剂盒提取，提取物上样电泳显示，没有质粒。这是为什么呢？请赐教，谢谢！ |
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wuyuanqing
金虫 (正式写手)
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根据我做大肠一些年的经验判断，杂菌的可能性比较小。我以前没有这个问题是因为我们之前是不做菌液或菌落pcr的，换个地方后为省钱要求做，于是以前没见过的问题就出来了，有些问题想想就知道原因，但这个问题我比较困惑，没有质粒却能扩出目的大小条带还能生长，有没有可能是质粒被整合到基因组上了呢？至于载体与目的基因大小都是很平常的那种，都不超过3k。 发自小木虫Android客户端 |
13楼2015-10-24 20:45:01
kangaroo0513
新虫 (正式写手)
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wuyuanqing3楼2015-10-24 12:22:08
5楼2015-10-24 14:12:29
6楼2015-10-24 17:19:38
