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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 构建植物表达载体pbi121的困惑
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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龚小亮

新虫 (小有名气)

[求助] 构建植物表达载体pbi121的困惑 已有2人参与

构建植物表达载体上的疑惑：载体是pbi21，将用来转化拟南芥，构建的过程中，我用双酶（Xba I和SmaI)酶切，后酶连我的目的片段，直接使用的是pbi121自身携带的35s启动子，没有去掉终止密码子（TAG），后面保留有GUS。   我这样做行吗？
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1楼 2015-10-22 20:11:29
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四喜四喜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yvonne9044 at 2015-10-23 00:01:23
我跟你还有点不一样，我把gus也切掉了……

我也是切掉了GUS连我的目的基因，但是构好的载体测序无信号，质粒浓度是150，测序引物是35s，层主遇到过测序的问题吗？

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12楼2020-07-16 10:58:24
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
龚小亮: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢您的解答 2015-10-22 20:41:46
你这样做，转化株没有gus活性的

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2楼2015-10-22 20:34:39
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龚小亮

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-10-22 20:34:39
你这样做，转化株没有gus活性的

我只需要验证我基因的功能，不需要知道定位情况，这样做的话，可以达到我的目标吗？  GUS一定不会表达吗？  谢谢你
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3楼2015-10-22 20:41:22
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 龚小亮 at 2015-10-22 20:41:22
我只需要验证我基因的功能，不需要知道定位情况，这样做的话，可以达到我的目标吗？  GUS一定不会表达吗？  谢谢你...

至少，你这个载体就不好构

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4楼2015-10-22 21:05:31
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