24小时热门版块排行榜    

查看: 2944  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

LYforever

新虫 (小有名气)

[求助] 关于大肠杆菌同源重组敲除基因的问题——请大家赐教! 已有5人参与

最近在做大肠杆菌的基因缺失,用的是Red同源重组系统,一次重组已经完成,并测序正确,但最近一直卡在二次重组,每次电转后涂布到A+C的平板上(傍晚),第二天早上就会发现平板上长一层菌苔,涂布棒涂到的地方整个一片,已经重复做了很多次,但还是同样的问题,一直都不知道问题到底出在哪里,不知道如何是好,恳请前辈们赐教!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LYforever

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 专吃虫 at 2015-10-16 07:29:44
大肠长得太快了,你不应该过夜的,培养几个小时就行了,本来涂布就有很多菌了,再长那么快肯定成菌台了

毕竟是筛选重组菌,效率不高的,不可能那一片菌苔都是阳性重组子啊

发自小木虫IOS客户端
9楼2015-10-18 21:53:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

专吃虫

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大肠长得太快了,你不应该过夜的,培养几个小时就行了,本来涂布就有很多菌了,再长那么快肯定成菌台了

发自小木虫Android客户端
2楼2015-10-16 07:29:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
培养时间短一点看看。
蓝精灵
3楼2015-10-16 08:10:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡亚梅

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
把菌的浓度降低一点,培养时间缩短。建议重新更换抗生素,感觉有抗生素失效的可能性
小虫虫~~
4楼2015-10-16 08:42:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +6 墨墨漠 2026-03-18 6/300 2026-03-20 00:02 by 23Postgrad
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +8 zlingli 2026-03-13 8/400 2026-03-19 16:32 by 轻松不少随
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分,有科研经历,求调剂 +3 一瓶苯甲酸 2026-03-14 3/150 2026-03-19 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 7/350 2026-03-19 14:52 by 功夫疯狂
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 一志愿南昌大学,327分,材料与化工085600 +3 Ncdx123456 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:18 by houyaoxu
[考研] 297求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-17 8/400 2026-03-18 14:30 by laoshidan
[考研] 302求调剂 +10 呼呼呼。。。。 2026-03-17 10/500 2026-03-18 12:45 by Linda Hu
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 环境工程调剂 +8 大可digkids 2026-03-16 8/400 2026-03-18 09:36 by zhukairuo
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考研] 278求调剂 +5 烟火先于春 2026-03-17 5/250 2026-03-18 08:43 by 星空星月
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
信息提示
请填处理意见