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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 请教：色谱柱的修复
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luzhenju

金虫 (小有名气)

[交流] 请教：色谱柱的修复

实验室有几根柱效下降，出现托尾，甚至M峰的苯基液相色谱柱，我想将其修复，请教各位有修复经验的高手给予指点，多谢！
柱子使用时，用的流动相含缓冲盐，pH2.5，使用最多2个月就坏了，可惜啊。
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1楼 2008-09-02 09:20:30
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luzhenju

金虫 (小有名气)
谢谢楼上的建议！
补充一下：我的流动相中含有一定比例的盐酸三乙胺，进样量是20μl。另外，每次做完之后，先用纯水冲5分钟（0.5ml/min），再用的5%甲醇冲100分钟（0.5流速），最后用纯甲醇冲60-80分钟0.5流速。
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3楼2008-09-02 10:23:49
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gloria288

木虫 (小有名气)
★
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q
峰拖尾的解决方法：
①        流动相加入30mMol三乙胺（用于碱性化合物）或醋酸胺（用于酸性化合物）。
②        如仍解决不了，可换成二甲基辛胺或醋酸二甲基辛胺。
③        降低进样量至<1μg。
④        柱头污染可用二氯甲烷-甲醇-氢氧化铵（95：4：1）冲洗，或由专业人员拆下清洗。我以前是拆下用超声超的。

PS：你用的流动相的PH比较低，所以柱子会有一定的损坏。流动相中含盐，最好每次做好后，先换成无盐的流动相作为过渡，最后用甲醇冲。不要嫌麻烦。
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2楼2008-09-02 10:06:57
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vvyyme

银虫 (初入文坛)
尽量不要用纯水冲柱子吧
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4楼2008-09-02 17:00:55
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chenfengpolang

金虫 (著名写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！
引用回帖:
Originally posted by luzhenju at 2008-9-2 09:20:
实验室有几根柱效下降，出现托尾，甚至M峰的苯基液相色谱柱，我想将其修复，请教各位有修复经验的高手给予指点，多谢！
柱子使用时，用的流动相含缓冲盐，pH2.5，使用最多2个月就坏了，可惜啊。

你的意思是要修复，自己修也可以，你把进口拆开，把出口接在溶剂，开泵将填料打出，柱头约1/3弃掉，剩余的用干净的具塞瓶收集，备用。
    将要修的柱子，依法打开，用木质挖掉柱头约2-3cm,注意挖平，将前面打出来备用的调料，用甲醇湿润填充置柱子内，压实，略挥干，再填再压实，封口，注意拧紧，不能有漏液，如筛板有污染，用10%的硝酸超声清洗。
装上液相仪，加压至30Mpa保持15min ,拆开，再补填料，压平，封口。估计就差不多了。
   想要更好的修复效果，还是在这看看：http://www.ncchf.cn/Product.asp?BigClassName=液相色谱柱修复
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乘风破浪，生生不息，衔一枝橄榄，为你带来永远的春天，和你慢慢地变老，幸哉，乐哉！
5楼2008-09-02 17:22:00
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