24小时热门版块排行榜    

查看: 884  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

fe123333

金虫 (小有名气)

[求助] 双向电泳:为什么我的2D胶银染后显色不到1分钟就过染色了?急求!!!

我的银染步骤如下:
固定2h:        50%乙醇,10%乙酸  40%超纯水
敏化30min:        30%乙醇,0.2%硫代硫酸钠,6.8%无水乙酸钠  0.125%戊二醛        
漂洗5min×3次:        超纯水        
银染10min:        0.1%硝酸银,0.02%甲醛        
漂洗40秒×2次:        超纯水        
显色:2.5%碳酸钠,0.01%甲醛        
终止:1%乙酸        10min

在显色步骤我的操作是:不到一分钟(约55秒)就倒掉显色液,然后立马加入终止液,结果显色结果许多蛋白点出现空穴,请问这是否为过染色现象?染过的原因是什么呢?

双向电泳:为什么我的2D胶银染后显色不到1分钟就过染色了?急求!!!
bw102h2793372_1442415631_793.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lini-828127

木虫 (小有名气)

3楼2015-09-24 13:05:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

fe123333

金虫 (小有名气)

我的增敏液,银染液,显色液是在固定前和固定液一起配好的,大约放置两个半小时才用,不知道和这个有关系吗?
我看有人说这些都要现配现用,我放两个小时时间也不算长吧?
2楼2015-09-24 10:00:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fe123333

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lini-828127 at 2015-09-24 13:05:06
你的电泳程序是?

电泳程序?是指等电聚焦程序吗?我的是50V水化14h, 250V 1h, 500V 1h, 1000V 1h, 10000V 5h, 10000V到90000Vh 结束
4楼2015-09-25 08:54:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见