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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 1700bp目的片段连不上pCAMBIA2301表达载体
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lwmhxy

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
30楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-09-22 13:08:06
有一点你是不是忽略了，如果直接把基因插在MCS区域是不会表达的

我的2301是改造过的，加了启动子和终止子，可以表达的，现在是平板不长菌，目的片段肯定切开了，但不能确定载体是不是双切开了

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遇一人白首，择一城终老
51楼2015-09-22 21:30:02
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
52楼2015-10-07 14:19:52
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kingjazz23

金虫 (小有名气)
引用回帖:
51楼: Originally posted by lwmhxy at 2015-09-22 21:30:02
我的2301是改造过的，加了启动子和终止子，可以表达的，现在是平板不长菌，目的片段肯定切开了，但不能确定载体是不是双切开了
...

我最近也遇到这样的问题，想请教一下你是怎样解决的？谢谢，或者可不可以加我QQ，大家交流一下
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53楼2016-05-24 15:12:34
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Neo2000

木虫 (著名写手)
你这个片段铁定插不进去的，载体会自连的，同尾酶啊

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54楼2016-05-24 17:27:58
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lwmhxy

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
53楼: Originally posted by kingjazz23 at 2016-05-24 15:12:34
我最近也遇到这样的问题，想请教一下你是怎样解决的？谢谢，或者可不可以加我QQ，大家交流一下...

我连接时间加长了

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遇一人白首，择一城终老
55楼2016-05-25 18:55:42
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侠客llp

新虫 (初入文坛)
你好，我现在也在做连接转化，载体也是pCAMBIA2301，酶切位点和你的一样，BamH I和 KpnI，目的片段1000bp左右，酶切体系和连接体系都差不多，但昨天我转化凃板不长菌落，请问你后面这个问题有没有解决啊，是什么原因啊？
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56楼2018-09-01 10:56:31
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侠客llp

新虫 (初入文坛)
你好
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57楼2018-09-01 11:02:03
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