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江漓湄best

金虫 (小有名气)

[交流] 荧光定量PCR 预变性时间、加入引物的反应体系保存 已有6人参与

本人刚开始学习做定量PCR实验过程中遇到两个问题:
1)使用的是TOYOBO SYBR  本来是95℃预变性1min,由于粗心,程序设定成95℃,10min,这么一来,对Ct值的影响大不大?需要重做吗/
2)将引物,SYBR,无酶水按比例配成反应体系,能不能置于-20℃冰箱保存1-2天?
在网上浏览了下,说法不一,还请大神给出宝贵的知道意见,谢谢了!
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Mis_Q

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
做实验难道不进行重复验证吗?
5楼2015-09-21 15:17:12
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然处

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
预变性十分钟没多大问题,混样把引物和染料混一块还是有点不妥。

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迷茫会结束的
2楼2015-09-20 19:42:55
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江漓湄best

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 然处 at 2015-09-20 19:42:55
预变性十分钟没多大问题,混样把引物和染料混一块还是有点不妥。

嗯嗯,非常感谢
3楼2015-09-20 22:55:13
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haze12344

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般是不加好放,因为燃料都是很遇光就降解的,要避光保存的东西。每次现配现用最好
生物你好
4楼2015-09-21 11:16:56
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