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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 我的蛋白电泳怎么了？？？抓狂中。。。。。。
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小橘子2013

新虫 (小有名气)

[求助] 我的蛋白电泳怎么了？？？抓狂中。。。。。。 已有10人参与

从昨天开始配置的15%SDS-page，5%浓缩胶，上样后电泳就出现了这个样子的怪状！maker在积层胶就早早的分离也压不成一条线，其余的蛋白貌似压成一条线后换120V电压。溴酚蓝呼呼跑，但是marker 就在分离胶的上层不往下走，等溴酚蓝已经跑到底时 它还是在那  染色脱色后蛋白门也都在那 现在真是奇怪啊，抓狂。。。。怎么就突然这样了呢！！！！！！！！！！！！附图正在电泳着的样子！！！

我的蛋白电泳怎么了？？？抓狂中。。。。。。
IMG20150916151546.jpg
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简简单单才是真
1楼 2015-09-16 15:30:50
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大刀小敏

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

10％的胶条带跑的比较开。15％的胶需要多跑一段时间，将溴酚蓝跑出去后再电泳一段时间。

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33楼2015-09-18 12:24:26
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郭冠霖

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-16 20:12:07
你连蛋白分子量都没说。。。问你电泳的技术支持。问他们你这种蛋白要用多少浓度的胶。然后你确定MAKER的浓度。你看颜色搞毛。看MAKER

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2楼2015-09-16 15:39:40
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-16 20:12:21
小橘子2013: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-09-21 17:03:45
确认下浓缩胶和分离胶的各种组分，浓度、pH等
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3楼2015-09-16 15:46:41
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小橘子2013

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 郭冠霖 at 2015-09-16 15:39:40
你连蛋白分子量都没说。。。问你电泳的技术支持。问他们你这种蛋白要用多少浓度的胶。然后你确定MAKER的浓度。你看颜色搞毛。看MAKER

marker是14-100KD 一共七条带   我的目的蛋白是18KD左右  之前一直用的15%的分离胶 最后一条浅黄的的14KD marker 会一直跟着溴酚蓝往下跑的  现在是14KD的marker都不往下走  你知道这会是什么原因吗？
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简简单单才是真
4楼2015-09-16 16:27:53
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