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沙海林空

木虫 (正式写手)

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专业: 化学反应工程

[求助] 关于质粒提取遇到的问题已有5人参与

我想用大肠杆菌来进行质粒的抽提，但我首先需要让质粒在大肠杆菌体内产生，
请问通常是用什么办法把原先的质粒导入到细菌体内？
生物小白，希望各位高手帮忙
谢谢

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Die-Luft-der-Freiheit-weht.

1楼 2015-09-16 09:27:02

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蘑菇头1

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 3553360
注册: 2014-11-22
专业: 蔬菜学与瓜果学

【答案】应助回帖

热激转化感受态细胞，将质粒（20ng以上）加入感受态，冰上静置30min，42℃热激90s，冰上静置3~5min，超净台上加入1mL的液体LB，摇菌1~1.5h后离心1min，弃上清，留约100微升的液体，用枪吸打使之悬浮混匀，后涂布到加有相应抗生素的固体LB板上，37℃先正放0.5h，后翻板倒放8~12h即可