| 查看: 2109 | 回复: 4 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
shxteacher铁杆木虫 (正式写手)
|
[交流]
关于NTA-Ni纯化带有Flag标签的融合蛋白
|
||
|
本人今天实验发现一个奇怪的现象： 我讲带有Flag标签的融合蛋白的细胞裂解液过NTA-Ni的重力柱，然后用1xBinding buffer洗柱子（15倍柱体积），然后直接用1xStrip buffer（主要成分是EDTA溶液），并且收集1xStrip buffer的洗脱液（1倍柱体积），然后跑SDS-PAGE，发现存在一个比较纯的而且是带有Flag标签的目的蛋白。 说明：目的蛋白仅带有Flag标签，不带有His标签。 我很疑惑：难道Flag标签的融合蛋白也可以吸附在NTA-Ni重力柱？ Flag tag的蛋白序列：DYKDDDDK His tag的蛋白质序列：HHHHHH 我在怀疑是不是Flag标签中含有较多的天冬氨酸，也可以螯合Ni？ 不知道有木有科研同仁遇到这样的情况？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有267人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于蛋白质诱导和纯化的问题
已经有0人回复
- 关于Ni-NTA纯化蛋白
已经有19人回复
- 关于用Ni-NTA His.bind树脂纯化原核表达蛋白
已经有16人回复
- 【求助/交流】关于Ni-NTA
已经有12人回复
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-14 23:07:12
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-14 23:07:12
|
本帖内容被屏蔽 |
5楼2015-09-14 22:32:11
2楼2015-09-13 09:51:39
naringenin
新虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 112.3
- 红花: 1
- 帖子: 52
- 在线: 106.7小时
- 虫号: 2368503
- 注册: 2013-03-22
- 专业: 生物化学
3楼2015-09-13 15:49:27
hc-material
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +702 - 应助: 517 (博士)
- 金币: 467.7
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.9小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
- 性别: GG
- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
4楼2015-09-14 09:35:45
