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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 请教：柱效比前一天降低很多会是什么原因？该如何解决？
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hua_td2008

[交流] 请教：柱效比前一天降低很多会是什么原因？该如何解决？

我用的是Agilent zorbax Eclipse XDB-C8 柱子 15cm长。流动相：磷酸二氢钾（10.54g溶于775ml水中，用磷酸调PH至2.5）-乙腈（775：225）。前天做柱效是5500，昨天做2200，今天做柱效不足2000。
请问会是什么原因啊？柱效还能上去么？这柱子还能用么？
很急……请高人帮祝！谢谢了
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1楼 2008-08-27 18:14:30
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)
进气泡的可能性较大，倒过来冲柱子。
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除了你的亲人，没有人应该对你好，对你好的人，一定要珍惜。
2楼2008-08-27 21:06:42
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hua_td2008

可是柱压并没有明显波动啊，会是进气泡么？
倒过来冲柱子的话用多大的流速，用什么流动相较好啊？
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3楼2008-08-28 08:52:55
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lanwoco

铜虫 (小有名气)
缓冲盐的浓度不低啊，这也有可能为原因之一，是不是非要用这么高的浓度呢？
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4楼2008-08-28 09:27:52
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hua_td2008

流动相都是按照国家标准配置的，应该不会有问题吧
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5楼2008-08-28 09:41:21
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twt_1975

木虫 (小有名气)
缓冲盐的问题，浓度太大了，做完样后要彻底清洗柱子，最好先用水冲一会，低于20分钟，再用低于5%甲醇多冲一会，将盐彻底清洗掉。再过渡到甲醇。
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6楼2008-08-28 10:33:41
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hua_td2008

那我这柱子还能用么 柱效还能否提上来啊……？？
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7楼2008-08-28 13:28:34
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chenfengpolang

金虫 (著名写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！
可以，但要用5%热甲醇水冲1小时以上，0.5ml/min,然后过渡到甲醇，有柱温箱的话，直接将柱温提到45度，不加热难于解决。另外，如保留时间在15分钟前的话，可降低乙腈2个点，也可提高柱效。坚决反对倒冲，否则报废就在眼前。
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乘风破浪，生生不息，衔一枝橄榄，为你带来永远的春天，和你慢慢地变老，幸哉，乐哉！
8楼2008-08-28 17:44:06
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chenfengpolang

金虫 (著名写手)
记住，冲柱子尤其是高盐流动相，一定要有耐心，水冲不要少于2小时，有机最好活化多于2小时，也可低流速过夜。
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乘风破浪，生生不息，衔一枝橄榄，为你带来永远的春天，和你慢慢地变老，幸哉，乐哉！
9楼2008-08-28 17:47:21
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nnxll

金虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指点！
1.你的缓冲盐浓度太高。2.水相比例比较高。一般AGILENT色谱柱不可以采用高的水相的体系。建议采用至少要含75%的水相，进行冲洗。
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10楼2008-09-22 20:02:03
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