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mogana1991新虫 (初入文坛)
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[求助]
黄瓜枯萎病菌尖孢镰刀菌，怎么接种到PDA平板上，以及怎么感染黄瓜
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我是挑了菌，直接点到PDA平板上，但是最近老污染， 我用无菌水冲洗平板，制成孢子悬浮液，伤根法接种黄瓜幼苗（两片真叶），现在已三天，无任何感病症状 求给出正确建议和指导 |
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mogana1991
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4楼2015-11-30 11:51:04
shuchiwsw
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
mogana1991: 金币+6, 博学EPI+1 2015-11-30 20:54:08
mogana1991: 金币+6, 博学EPI+1 2015-11-30 20:54:08
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不知道lz污染什么，是从什么上接种出来。 1、如果是带病的植物样本，首先得配置1/4的PDA，然后加入抗生素。接种前先对植物叶片进行消毒，接种时尽量选取感病区域的样品进行转接，及时观察，发现单菌落就及时挑出，不要等一段时间后再转接。从植物样品中接出需要考虑到植物内生菌，植物叶片表面微生物的污染。 2、如果是从保存菌株接出的话，那就要考虑保存的样品是否有污染。如果是细菌污染，那么可以加入抗生素，如果抗生素不管用的话，可以在培养一段时间后采用三明治法将目标菌株和污染细菌分离开来。如果是真菌污染的话，把样品用无菌水冲洗后，多次稀释后涂平板，但要及时将单菌落挑出。 3、如果是从平板转接时污染，相关操作可以参考2。 微生物操作的主要污染源就是细菌和真菌，细菌污染一般是因为使用的材料灭菌不完全造成的，使用前应严格灭菌。真菌污染一般是由于操作不当污染的，一般都是孢子污染，比如说平皿开闭不够迅速，导致杂菌孢子落入。所以避免真菌污染就要保证操作的快速准确，有开口的器皿，如平皿，试管，避免长时间裸露在操作环境中。进行实验室，无论是在工作台内外，都要保证空气流动的稳定，突然的气流扰动是最容易造成真菌污染的原因。 至于病原菌感染宿主，这个影响因素太多了，建议lz把每个操作环节进行分类，然后用正交的方法对每一种组合进行一下验证，选出最适的接种和培养条件。 PS：很多文献里的接种条件不一定适用lz的实验室，所以还得自己摸索。 |
2楼2015-09-10 10:10:56
mogana1991
新虫 (初入文坛)
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3楼2015-11-30 11:47:11
6