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tankleiming

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你那个是真核生物吧,细菌16s可以
之所以深沉
11楼2015-09-11 10:59:19
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runye2015

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hutingting at 2015-09-10 14:03:56
另外我们检测真核细胞某基因的DNA水平,是提取基因组DNA,以GAPDH为内参的,用的是绝对定量测拷贝数,细菌中有的基因在基因组是单拷贝的,具体情况具体对待吧,可以找几篇文献看看...

嗯嗯~真是太感谢了!

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12楼2015-09-11 23:19:33
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runye2015

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 我不是小郭 at 2015-09-10 16:17:36
根据实验的实际情况,不同组织、不同细胞、细胞的不同生理时期、不同的理化条件刺激等,查阅相关资料,选取三、四合适的内参基因,做荧光定量PCR,先以CT值最小的那条基因作为内参,其他几条内参基因与其相比,分析 ...

嗯~学习了!!非常谢谢!!

[ 发自小木虫客户端 ]
13楼2015-09-11 23:25:17
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duoyidian

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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4楼: Originally posted by 王平阳 at 2015-09-08 20:40:27
用DNA做定量?这个。。。什么目的啊?如果是基因组DNA作为模板定量,那么你说的几种都不能用,那是cDNA做模板定量的内参,没听说过用基因组DNA为模板的定量,建议你还是想想你这样做的目的是什么。
不好意思没帮到 ...

如果已知基因组中某个基因为单拷贝,就可以那这个基因作为内参了
14楼2015-09-14 13:35:38
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请叫我悠悠

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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6楼: Originally posted by hutingting at 2015-09-10 11:40:37
我做过,测各个菌株的RNA水平,逆转录之后cDNA为模板,16S做内参的,引物序列文献里有,去合成一对就是了

您好 我想咨询一下 细菌荧光定量pcr内参的选择 我做的是假单胞菌 16sRNA 引物是通用的吗?还是每个菌都不一样 求告知

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15楼2017-06-02 23:51:05
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我也想学好pcr

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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6楼: Originally posted by hutingting at 2015-09-10 11:40:37
我做过,测各个菌株的RNA水平,逆转录之后cDNA为模板,16S做内参的,引物序列文献里有,去合成一对就是了

16s是通用的吗?

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16楼2017-06-03 21:10:49
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剪秋

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我做的是小鼠肠内容物DNA的rt pcr,用的内参是总菌EUB,是实验室流传下来的,不知道能不能帮到你啊

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17楼2017-06-04 22:38:56
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