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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 反白？请问Westernblot出现这样的条带是什么原因?
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apple_Y

木虫 (初入文坛)

[求助] 反白？请问Westernblot出现这样的条带是什么原因? 已有5人参与

在WB时有两个蛋白总是出现第一张图的现象：泳道之间是黑色，泳道上应该显示条带的位置却显示比较浅的颜色，跟常说的“反白”现象也不相同。
第二张图跟第一张图是不是同样的情况，只是程度不同？

请问出现这种现象的原因是什么？该怎么解决？
谢谢。

反白？请问Westernblot出现这样的条带是什么原因?
1.PNG


反白？请问Westernblot出现这样的条带是什么原因?-1
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1楼 2015-09-02 15:17:57
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黄老邪01

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
变性的时候没处理好吧

[ 发自小木虫客户端 ]
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我就是我，颜色不一样的烟火！！
2楼2015-09-02 15:43:17
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apple_Y

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 黄老邪01 at 2015-09-02 15:43:17
变性的时候没处理好吧

你是说样品处理么？可是内参显色正常。

发自小木虫Android客户端
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3楼2015-09-02 15:51:55
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evangelina

无虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
apple_Y: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-09-05 15:15:33
我觉得是blocking没有做好，你用的是脱脂奶吗，试试改用BSA
再不就是一抗或者二抗稀释不够，信号太强了
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4楼2015-09-02 15:56:57
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试试现在用的一抗再稀释一百倍后会不会还这样。
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5楼2015-09-03 00:36:14
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
apple_Y: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-09-05 15:15:54
抗体太浓了，本来不该有条带的地方全都结合上了抗体；本来该有条带的地方结合的抗体太多太多反应时能量太高直接烧掉了，所以显示出来没有条带。这是我的解释，如果稀释了有改善那可能真的是这样。
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6楼2015-09-03 00:39:39
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要么没封闭好，要么二抗是垃圾
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
7楼2015-09-03 06:24:02
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sonyangg

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是CCD的问题，系统重启一次就好了
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8楼2015-09-04 19:57:50
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apple_Y

木虫 (初入文坛)
最终通过提高蛋白浓度，减少曝光时间解决。
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9楼2015-09-08 18:28:53
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