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cbsbigbang

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR结果条带弯曲,而且有暗色条带重叠?怎么回事求解 已有2人参与

如题,negative control 有一个出现了条带,仔细观察发现三个样品m1-m3也有相同的重叠条带,有没有人遇到相同的问题?

PCR结果条带弯曲,而且有暗色条带重叠?怎么回事求解
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baichi121234

禁虫 (职业作家)

本帖内容被屏蔽

2楼2015-09-01 13:46:53
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枭翔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没问题,可以继续向下做
3楼2015-09-01 13:54:46
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)

制胶和跑电泳可能存在问题,如果不放心的话可以再跑一次电泳。
4楼2015-09-01 14:16:27
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cbsbigbang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 枭翔 at 2015-09-01 13:54:46
没问题,可以继续向下做

negative control有一个条带也没问题吗?
5楼2015-09-02 08:34:29
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helios_hj

至尊木虫 (著名写手)

你的negative control是否和模板一起扩增的?如果是,考虑反应体系,或者模板是否有污染
条带弯曲,和电泳电压、凝胶浓度,均质度等等都有关系
Ifyouthinkyoucan,youcan!!!
6楼2015-09-02 12:41:45
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枭翔

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cbsbigbang at 2015-09-02 08:34:29
negative control有一个条带也没问题吗?...

可能你的引物特异性不太好,与载体可以结合,刚好扩出来的片段大小跟你的目的条带一样大。之所以,条带不亮,可能是由于你的PCR条件不合适对于这个非特异性的条带来说。所以,先向下做。同时这个PCR实验重新做一遍,为了保险起见。
7楼2015-09-02 13:38:25
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
电压设置有问题,有点高了
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
8楼2015-09-02 15:53:28
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