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cbsbigbang

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR结果条带弯曲，而且有暗色条带重叠？怎么回事求解 已有2人参与

如题，negative control 有一个出现了条带，仔细观察发现三个样品m1-m3也有相同的重叠条带，有没有人遇到相同的问题？

PCR结果条带弯曲，而且有暗色条带重叠？怎么回事求解
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1楼 2015-09-01 12:56:05
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baichi121234

禁虫 (职业作家)
本帖内容被屏蔽
2楼2015-09-01 13:46:53
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枭翔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没问题，可以继续向下做
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3楼2015-09-01 13:54:46
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)
制胶和跑电泳可能存在问题，如果不放心的话可以再跑一次电泳。
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4楼2015-09-01 14:16:27
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cbsbigbang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 枭翔 at 2015-09-01 13:54:46
没问题，可以继续向下做

negative control有一个条带也没问题吗？
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5楼2015-09-02 08:34:29
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helios_hj

至尊木虫 (著名写手)
你的negative control是否和模板一起扩增的？如果是，考虑反应体系，或者模板是否有污染
条带弯曲，和电泳电压、凝胶浓度，均质度等等都有关系
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Ifyouthinkyoucan,youcan!!!
6楼2015-09-02 12:41:45
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枭翔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cbsbigbang at 2015-09-02 08:34:29
negative control有一个条带也没问题吗？...

可能你的引物特异性不太好，与载体可以结合，刚好扩出来的片段大小跟你的目的条带一样大。之所以，条带不亮，可能是由于你的PCR条件不合适对于这个非特异性的条带来说。所以，先向下做。同时这个PCR实验重新做一遍，为了保险起见。
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7楼2015-09-02 13:38:25
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电压设置有问题，有点高了
赞一下(1人) 回复此楼
路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
8楼2015-09-02 15:53:28
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