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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 综合其他 » 利用biacore得到的SPR曲线，选择何种模型进行拟合
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liashry

新虫 (小有名气)

[求助] 利用biacore得到的SPR曲线，选择何种模型进行拟合 已有1人参与

目前，利用biacore T200进行样品和蛋白的亲和力试验，得到如下spr曲线，
但是令我非常困惑的是，我们在选择拟合模型的时候，
如果用steady state模型拟合，则发现样品和蛋白Kd为100 M ，完全无亲和力，
但是用1:1 模型拟合时，样品和蛋白的亲和力较好，Kd可以达到nM级别，
所以请教各位大神，针对此曲线，我选择哪种模型比较合适？
另外评价模型的可靠性的参数有哪些呢？

利用biacore得到的SPR曲线，选择何种模型进行拟合
图片 1.jpg
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1楼 2015-09-01 10:35:17
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Sureking

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
liashry: 金币+8, ITC验证，很好的建议 2015-10-27 08:43:36
反应值低了点，有可能是假阳性的结果，建议用ITC验证一下。拟合的化，动力学拟合更合适一些，因为并没有完全解离，平衡态拟合并不太合适。
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Sureking
2楼2015-10-26 17:04:56
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liashry

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Sureking at 2015-10-26 17:04:56
反应值低了点，有可能是假阳性的结果，建议用ITC验证一下。拟合的化，动力学拟合更合适一些，因为并没有完全解离，平衡态拟合并不太合适。

恩，谢谢您的建议，给了我很大的帮助，专家啊
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3楼2015-10-27 08:59:32
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china_vv

新虫 (初入文坛)
生物狗一只，在其他实验室做了SPR，想测Kd的，但是不会处理数据，他们实验室也不太懂我这个小分子和蛋白的结合，请问您有什么资料吗？RU是怎么算的呢？方程用RU计算还是用信号强度Bmax呢？
门外汉，求助，恳请赐教！
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4楼2018-09-16 11:42:20
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Du_Ke

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Sureking at 2015-10-26 17:04:56
反应值低了点，有可能是假阳性的结果，建议用ITC验证一下。拟合的化，动力学拟合更合适一些，因为并没有完全解离，平衡态拟合并不太合适。

可以教教我这个数据处理么？
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5楼2018-09-20 22:57:08
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